流式細胞分選技術(shù)服務(wù)服務(wù)編號：SV1401

一、簡(jiǎn)介/定義

細胞分選(cell sorting)是根據細胞所具有的特性將某種特定的細胞亞群從混合的細胞樣品中分離出來(lái)的一種技術(shù)。

流式細胞分選(Flow cytometry sorting)是在流式細胞術(shù)檢測細胞表型的基礎上，使用充電分選技術(shù)以實(shí)現多種特定表型細胞的鑒定、分類(lèi)、定量和分離。具有分選參數多、群體多、純度高、靈活性強等優(yōu)勢。分選后細胞可做進(jìn)一步生物學(xué)研究如單細胞測序等。

活細胞的熒光激活細胞分選(FACS)根據熒光標記將細胞群分成亞群。與非分選流式分析相比，流式細胞分選涉及更復雜的機制。使用熒光偶聯(lián)抗體染色的細胞可以根據它們所染色的熒光團而彼此分離。例如，表達一種細胞標記物的細胞可以使用識別該標記物的FITC偶聯(lián)的抗體來(lái)標記，而表達不同標記物的另一種細胞類(lèi)型可以使用對該標記物特異的PE偶聯(lián)的抗體來(lái)標記。流式細胞分選可基于不同的熒光標記將不同類(lèi)型的細胞分離，這就是流式細胞分選術(shù)的基本原理。

二、 設備特點(diǎn)

Invitrogen? Bigfoot全光譜流式細胞分選儀配有Sasquatch軟件(SQS)，可提供創(chuàng )新、易用、高速、安全的細胞分選，滿(mǎn)足您所在實(shí)驗室當前和未來(lái)的研究需求。具有更高的靈敏度、分辨率，更高的分選效率，配置有4個(gè)激光器，27個(gè)檢測通道，可進(jìn)行復雜的分選。

三、 儀器配置

四、 服務(wù)流程

1. Tip: 請您填寫(xiě)項目申請表，以便我們?yōu)槟峁└玫募夹g(shù)服務(wù)。

2. 客戶(hù)提交流式細胞分選檢測請求與實(shí)驗要求，與公司商定具體的實(shí)驗項目、數量和費用，雙方簽訂《委托流式細胞分選檢測服務(wù)合同書(shū)》。

3. 客戶(hù)提供檢測樣品，我公司按照協(xié)定要求安排檢測項目預實(shí)驗，雙方根據預實(shí)驗結果商定實(shí)驗技術(shù)參數細節。

4. 公司實(shí)驗室正式開(kāi)展檢測實(shí)驗，在規定時(shí)間內向客戶(hù)提交實(shí)驗數據和檢測報告。

五、 送樣要求

1. 樣品濃度：細胞需無(wú)菌，細胞濃度不少于1-10×106 cells/ml。

2. 樣品體積：1-2ml/管，至少需要500μl/管。

3. 注意：

（1） 保證樣本的無(wú)菌狀態(tài)，因為分選得到的細胞還要繼續培養；

（2） 不能使用固定劑固定細胞，因為活細胞經(jīng)固定劑處理后即死亡；

（3） 保證上機樣品為單細胞懸液；

（4） 準備充足的細胞；

（5） 建議分選上樣管中的緩沖液使用含2% FBS的PBS，普通培養基中的酚紅可能會(huì )干擾分選；若用培養基的話(huà)，顏色不能太深，血清濃度不能超過(guò)2%，否則粘性太大影響分選。

（6） 如要分選GFP等轉染的樣品，請提供未經(jīng)轉染的相同細胞為陰性對照；

（7） 如要做多重熒光染色標本的分選，請務(wù)必準備未經(jīng)染色（或染有Isotype）及單染（單陽(yáng)）樣品，以便做檢測前補償校正用。

（8） 如要去除死細胞，在不影響后續實(shí)驗前提下，可以加入7-AAD或是PI。

（9） 由于在分選過(guò)程中，樣本可能通過(guò)液滴震蕩產(chǎn)生氣溶膠，所以不接受含有會(huì )傳播人類(lèi)病原微生物的生物有害樣本，也不接受含放射性生物樣品。

（10） 需告知細胞的大小與形態(tài)，以便選擇合適的噴嘴。所分選細胞的直徑最好小于噴嘴直徑的1/5，至少小于1/3。本機常規裝載100μm噴嘴，如有特殊需要，請提前與bioss（博奧森）技術(shù)人員溝通。

（11） 低含量細胞（占1%以下）的分選會(huì )導致低純度及低回收率。因此，我們建議事先富集你感興趣的細胞。

（12） 本儀器以分選為主，單純的流式分析實(shí)驗建議咨詢(xún)流式分型技術(shù)服務(wù)，分選前最好先使用其它流式細胞儀確認細胞陽(yáng)性染色比例。

五、服務(wù)時(shí)間

周一到周五 9:00--17:00（提前一天預約），實(shí)驗結果報告一周內提供，具體周期根據實(shí)驗內容而定。

六、收費標準

請聯(lián)系負責人詢(xún)價(jià)。

七、案例展示